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液相色譜定量分析原理及相關(guān)知識(shí)點(diǎn)

更新時(shí)間:2022-11-14      點(diǎn)擊次數(shù):1998

液相色譜定量分析原理

在定性的基礎(chǔ)上定量,需有純物質(zhì)作為標(biāo)準(zhǔn)物

液相色譜定量是相對(duì)定量的方法:即由已知量的純標(biāo)樣推算混合物中被測(cè)物的量

定量的依據(jù)是:

被測(cè)組分的量與響應(yīng)值(峰高或峰面積)成正比

由已知量的標(biāo)樣可求得定量校正因子

定量校正因子:是定量計(jì)算公式中的比例常數(shù),其物理意義是單位響應(yīng)值(峰面積)所代表的被測(cè)組分的量

測(cè)定未知組分的響應(yīng)值,通過(guò)定量校正因子即可求得其含量


液相色譜定量分析的步驟

1、選擇一個(gè)適合定量分析的色譜方法:

確認(rèn)被檢測(cè)組分峰,并達(dá)到分離度(R)大于1.5

確定被測(cè)組分色譜峰的一致性(純度)

確定方法的檢測(cè)限及定量限;靈敏度及線性范圍


2、用不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)樣品建立校正曲線

3、考查定量方法的準(zhǔn)確度及精密度

4、用相應(yīng)的色譜管理軟件實(shí)施樣品采集,數(shù)據(jù)處理及報(bào)告結(jié)果


鑒別需定量的色譜峰(定性)

定性鑒別每個(gè)要定量的色譜峰

先用標(biāo)樣確定欲定量之色譜峰的保留時(shí)間(Rt),通過(guò)比較保留時(shí)間,找到未知樣中各色譜峰所對(duì)應(yīng)的組份,色譜定性是用與標(biāo)樣比較保留時(shí)間的方法,判據(jù)并不充分

進(jìn)一步的確認(rèn)(定性)

1、標(biāo)準(zhǔn)加入法

2、同時(shí)用其它方法:其它色譜方法(改變機(jī)理,如:用不同的色譜柱) 、其它檢測(cè)器 (PDA:光譜圖比較、譜庫(kù)檢索;MS:質(zhì)譜圖解析、譜庫(kù)檢索)

3、其它儀器方法


確認(rèn)定量峰的一致性


確認(rèn)色譜峰的一致性(純度)

保證每個(gè)色譜峰下只有一個(gè)被測(cè)的組份

檢查是否有共流出的物質(zhì)(雜質(zhì))干擾

色譜峰一致性(純度)確認(rèn)的方法

用光電二極管矩陣(PDA)檢測(cè)器比較光譜圖

峰純度鑒定

2996的純度角理論

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